Identificación y desarrollo de protocolos para la detección de patógenos de importancia agrícola.

Proyecto Específico Cartera 2013 - 2019
Resumen Ejecutivo

Las enfermedades causadas por hongos, virus y procariotes, configuran una de las causas más limitantes en el rendimiento de los cultivos de importancia agrícola. Estas pérdidas se reflejan en la disminución del rendimiento como en la calidad de lo producido, mermando su competitividad tanto en los mercados internos como externos . La identificación y caracterización de los patógenos y el estudio de los vectores transmisores, proporcionan herramientas adecuadas para enfrentar la problemática de la sanidad de los cultivos dentro de un marco agrícola de sustentabilidad económica y ambiental. Para ello es fundamental contar con técnicas sensibles y específicas para realizar un correcto diagnóstico.
Los objetivos propuestos para este proyecto son: identificar, caracterizar y determinar variabilidad genética de patógenos de importancia agrícola, generar protocolos para una detección y diagnóstico sensible y específico de patógenos vegetales por metódos serológicos, moleculares, bioquímicos y/o biológicos y determinar la transmisibilidad de patógenos (virus, bacterias y fitoplasmas) y caracterizar a sus vectores.
Considerando las demandas presentadas por los Programas Regionales y los Programas Nacionales, se identificarán y caracterizarán patógenos virales en alfalfa, frutilla, cucurbitáceas, poroto, soja, prunoideas, girasol, maíz, batata, pimiento, trigo. Hongos y procariotes en alfalfa, olivo, vid, cítricos, banano, frutos tropicales, girasol, soja, trigo, avena, maíz, arroz, y colza.
Se elaborarán reactivos de diagnóstico de alta sensibilidad para frutilla , poroto, batata, soja, girasol, citrus, vid , tomate, pimiento, maíz, originando protocolos de diagnóstico reproducibles y confiables. Estos protocolos serán publicados en la Red Nacional de Protección Vegetal (RedNPV), para su difusión entre referentes y usuarios. Se estudiará la transmisión por medio de vectores, en alfalfa con fitoplasmas , virus de trigo y bacterias en cítricos.
La metodología a emplear serán técnicas serológicas (DAS ELISA, TAS ELISA, NC ELISA, ELISA indirecto, Inmunomicroscopía Electrónica), moleculares (PCR, qPCR, RT-PCR, PCR multiplex, nested PCR, RFLP, clonado y secuenciación). Se diseñarán cebadores específicos y se implementarán PCR para estos patógenos. Se realizarán aislamiento de hongos y bacterias en medios específicos, estudios morfológicos de colonias y estructuras fúngicas . Para los reactivos serológicos, se producirán antisueros a partir de purificaciones de virus de plantas sintomáticas, colonias bacterianas o a través de tecnología de DNA recombinante y se implementarán las técnicas serológicas principalmente DAS ELISA, NC ELISA, Tissue printing y ELISA indirecta, realizándose la calibración de reactivos y antígenos. Se estudiarán las especies vectoras capaces de transmitir patógenos sistémicos causales de enfermedades en los cultivos de cítricos, maíz, trigo y alfalfa. Para los estudios se procederá a la cría artificial de los mismos y la realización de ensayos de inoculación con diferentes tiempos de infección y estadíos ninfales.
El avance de los conocimientos en las temáticas planteadas y la disponibilidad de nuevas herramientas para el diagnóstico de estas enfermedades permitirán plantear estrategias para un mejor manejo y control de las enfermedades acordes con las exigencias de los mercados actuales y de una agricultura más competitiva, con una mayor eficiencia productiva y el empleo de alternativas de control de mínimo impacto ambiental que contribuyan a la protección de los recursos y a la apertura de mercados más exigentes.

Participantes
Soledad DE BREUIL, Eduardo Alejandro GUILLIN, Stella Maris PRIOLETTA, Angelica DAL ZOTTO, Daniel Horacio BASIGALUP, Nicolas Esteban BEJERMAN, Vilma Cecilia CONCI, Liliana Valeria QUEVEDO, Jose Roberto MARCELLINO, Ariel ODORIZZI, Graciela Ana Maria TRUOL, Paola Maria LOPEZ LAMBERTINI, Maria Fernanda ARIAS, Fabian GIOLITTI, Juan Carlos VELAZQUEZ, Sandra Claudia GARCIA LAMPASONA, Maria Virginia PEDRAZA, Noelia Mabel RUEDA, Jose Angel OLINUCK, Carlos Gaston VAGHI MEDINA, Liliana Del Valle DI FEO, Silvia Griselda BEJARANO, Beatriz Alida PEREZ, Diana Beatriz MARINI, Rosario VITORIA, Pablo Eduardo CAMPOS, Valeria AROLFO, Cecilia Alicia CESARI, Mariana Lourdes MIJOEVICH, Violeta Cristina BECERRA, Rosario VITORIA, Sara CACERES, Claudia NOME DOCAMPO, Maria Georgina ESCORIAZA, Ruben Dario VELAZQUEZ, Diego Darío CORDES, Maria Laura OTERO, Maria Fernanda MATTIO, Veronica Milagros TRUCCO, Luis Rogelio CONCI, Liliana Beatriz IRIARTE, Maria De La Paz GIMENEZ, Vanina Maria ALEMANDRI, Angel Cesar MATIAS, Angela Norma FORMENTO, Maria Raquel RYBAK, Patricia TOLOCKA, Pablo Daniel VELAZQUEZ, Franco Daniel FERNANDEZ, Claudia Alejandra LIBERMAN, Maria Cecilia PEROTTO, Maria Soledad BRANDIMARTE, Pedro DELLA GASPERA, Daniel ALVAREZ, Patricia RODRIGUEZ PARDINA, Miriam ASSELBORN, Julio Horacio GONZALEZ, Ignacio Antonio ERREGUERENA, Fabiana GUZMAN, Marina Rosa MONTOYA, Ana Valeria RODRIGUEZ, Walter Fabian ARCE, Myrian Asucena RYBAK, Marcelo Alberto DRUETTA, Ana Valeria RODRIGUEZ, Ramon Rodolfo SUASNABAR, Ada Karina TORRICO RAMALLO, Mauro Andres PACCIORETTI, Sandra Monica RODRIGUEZ, Evangelina Beatriz ARGUELLO CARO, Evangelina Beatriz ARGUELLO CARO, Mauro Andres PACCIORETTI