Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria

Las especies que componen el complejo Helicoverpa/Heliothis poseen una apariencia muy similar, siendo prácticamente indistinguibles en estado de oruga. Para un monitoreo adecuado, y para la adopción de medidas de control, es necesaria la identificación rápida y confiable de la plaga en cuestión. En el IMyZA-CICVyA-INTA se pusieron a punto dos metodologías de diagnóstico basadas en técnicas moleculares.

La primera, consiste en la identificación de Helicoverpa armigera y H. gelotopoeon por PCR-RFLP. Se procede a la extracción de ADN, amplificación parcial del ADN mitocondrial por PCR con cebadores universales especialmente diseñados para Heliothinae, y posterior digestión con enzima endonucleasa y electroforesis en gel. Se evidencian patrones de restricción únicos para H. armigera y H. gelotopoeon.
		PCR-RFLP de H. zea (1), H. armigera (2) y H. gelotopoeon (3). Calles 4, 5 y 6: muestras 1, 2 y 3 previo al corte con enzima.
La segunda, se basa en la identificación de especies del complejo Helicoverpa/Heliothis por PCR y secuenciación. Se realiza la extracción de ADN, amplificación parcial del ADN mitocondrial por PCR con cebadores universales especialmente diseñados para Heliothinae, secuenciación del fragmento y correspondiente análisis genético. En este caso, se ofrece la identificación de las siguientes especies: H. armigera, H. gelotopoeon, H. zea, H. assulta, H. punctigera, Heliothis virescens y H. subflexa.
		Cromatograma de secuenciación de H. zea

Ambas metodologías pueden ser aplicadas al reconocimiento de las especies en cualquier momento de su desarrollo (larva, pupa o adulto), contrariamente a la identificación clásica por microscopía de la genitalia, para la cual se requieren machos adultos.